流動(dòng)相 | 保質(zhì)期

各位老師知道流動(dòng)相的保質(zhì)期有多久嗎，經(jīng)常遇到有老師前來(lái)咨詢“咱們的流動(dòng)相能放多久啊，放一星期沒事吧”。但是老師，您知道嗎，流動(dòng)相放的時(shí)間太長(zhǎng)，可是會(huì)直接影響您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果呢。在這里就給各位老師說(shuō)道說(shuō)道流動(dòng)相的注意事項(xiàng)。

一：流動(dòng)相的貯存

流動(dòng)相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內(nèi)，不能貯存在塑料容器中。因許多有機(jī)溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑，導(dǎo)致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統(tǒng)，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴(yán)，防止溶劑揮發(fā)引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動(dòng)相。

磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長(zhǎng)霉，應(yīng)盡量新鮮配制使用，不要貯存。如確需貯存，可在冰箱內(nèi)冷藏，用前應(yīng)重新濾過。容器應(yīng)定期清洗，特別是盛水、緩沖液和混合溶液的瓶子，以除去底部的雜質(zhì)沉淀和可能生長(zhǎng)的微生物。

二：流動(dòng)相放置時(shí)間的影響

01 有機(jī)相揮發(fā)：有機(jī)試劑組成比例越大，沸點(diǎn)越低，其揮發(fā)程度越大，不過對(duì)于揮發(fā)相對(duì)比較好控制，只要密封好就可以；

02 pH值影響：反相色譜流動(dòng)相往往是緩沖鹽，其pH值受有機(jī)相的揮發(fā)、空氣中的二氧化碳等影響，有時(shí)甚至渾濁；且不同pH值及不同緩沖鹽其受影響程度不同；

03 微生物影響：水相體系時(shí)間久了，往往會(huì)致生微生物，特別受光照等影響，因此，往往在棕色瓶中儲(chǔ)存；另外，如果流動(dòng)相中有機(jī)相比例越大，其越不容易致生微生物；所以根據(jù)儲(chǔ)存條件及有機(jī)相比例不同其有效期不同。

所以各位老師要注意了，液相流動(dòng)相建議12小時(shí)以后和瓶子一起更換的，純有機(jī)相建議12小時(shí)抽濾，24小時(shí)以后帶瓶子一起更換。流動(dòng)相溶液忌微生物超標(biāo)，各種菌會(huì)導(dǎo)致柱子堵，而產(chǎn)生很多不良影響。我們都知道，室溫如果高了，純水相上午配的下午下班時(shí)候都有可能會(huì)有微生物繁殖，都需要重新過濾。所以，純水相要現(xiàn)配現(xiàn)用，別抱僥幸心理偷懶不配，結(jié)果誤差大的話，隨時(shí)可能讓你返工哦。

三：流動(dòng)相使用前要用過濾和脫氣

流動(dòng)相使用前用0.45μm濾膜過濾、脫氣，清除微粒和灰塵。在送液泵內(nèi)，為了防止雜物（固體）進(jìn)入流路，裝有吸濾器，但網(wǎng)孔徑為10μm，比此更小的顆粒仍然可通過，這會(huì)導(dǎo)致流路和柱子堵塞和污染。為此，建議常用0.45μm濾膜過濾。流動(dòng)相溶劑須經(jīng)脫氣，如不脫氣，在溶劑混合時(shí)，或壓力溫度變化時(shí)容易產(chǎn)生大量氣泡，會(huì)導(dǎo)致泵誤動(dòng)作和輸液不暢，檢測(cè)器產(chǎn)生噪聲信號(hào)等。

四：流動(dòng)相需要恢復(fù)到室溫下使用

流動(dòng)相恢復(fù)到室溫后使用。流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí)，流動(dòng)相在恢復(fù)到室溫前，基線水平很難穩(wěn)定，特別是發(fā)生漂移，也容易產(chǎn)生氣泡等現(xiàn)象。水與有機(jī)溶劑混合時(shí)，混合液變化大，往往會(huì)與室溫相差很大，務(wù)必注意。

五：避免使用帶有腐蝕性流動(dòng)相

流動(dòng)相含有濃硫酸、濃硝酸、二氯乙suan、二氯甲烷、丙酮、四氫呋nan、二甲亞砜等溶劑，會(huì)對(duì)流路中的PEEK樹脂管路強(qiáng)度變差、PEEK樹脂管容易破裂使溶劑外濺。流動(dòng)相含有鹵素離子的溶劑，如KCl、NaCI、NH₄CI等。對(duì)流路中的不銹鋼材料有腐蝕作用，以上的溶劑須盡量避免使用。非用不可時(shí)，分析完了后，應(yīng)立刻用蒸餾水把全流路清洗干凈。

六：在流動(dòng)相中加入有機(jī)試劑后測(cè)量pH值

所謂的pH值，是基于水為溶劑的體系才叫pH值，所以正確的調(diào)節(jié)緩沖溶液pH值的做法是在水溶液中進(jìn)行。如果添加了有機(jī)溶劑后再測(cè)量pH值，這其實(shí)與添加之前測(cè)量的pH值會(huì)有所不同。

然而，重要的一點(diǎn)是操作習(xí)慣要保持一致。如果習(xí)慣是在添加有機(jī)溶劑之后測(cè)量pH值，那只要確保每次的操作都是如此就可以了。雖然這樣操作不是100%的準(zhǔn)確，但至少它與之前的做法是一致的。這對(duì)于一個(gè)完整的研究來(lái)說(shuō)，相較之你在添加有機(jī)溶劑之前測(cè)量pH值而獲得了一次準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)來(lái)說(shuō)，保持一致的操作方法可能會(huì)更重要。

七：不要將流動(dòng)相試劑瓶中的

流動(dòng)相*用光

假如流動(dòng)相準(zhǔn)備的不夠充足，除了存在一定的泵和色譜柱空運(yùn)行的風(fēng)險(xiǎn)外，還會(huì)有其它的問題存在。如由于溶液中水會(huì)從試劑瓶的上方蒸發(fā)，所以試劑瓶頂部流動(dòng)相的成分已經(jīng)發(fā)生了改變。如果使用了瓶中后這部分試劑，事實(shí)上它們就是原來(lái)試劑瓶中頂部的那部分，當(dāng)它們通過色譜柱時(shí)可能會(huì)有渣滓滯留在色譜柱中。

八：使用超聲給流動(dòng)相脫氣

超聲法對(duì)于確保所用的緩沖鹽*溶解很有效，但它不是z有效的脫氣方法，而且由于超聲時(shí)溶液會(huì)快速升溫而導(dǎo)致流動(dòng)相中有機(jī)試劑蒸發(fā)。為了節(jié)省時(shí)間，可以花5min時(shí)間通過真空過濾機(jī)來(lái)過濾流動(dòng)相，這可以一步達(dá)到脫氣和過濾的兩個(gè)目的。