相信小伙伴們?cè)谌粘y(cè)試中會(huì)發(fā)現(xiàn),評(píng)價(jià)色譜峰的峰形對(duì)稱性,有拖尾因子、對(duì)稱因子、不對(duì)稱因子三種參數(shù)。而目前使用的分析軟件,ChemStation工作站中的對(duì)稱因子,Empower工作站中的USP拖尾因子,Chameleon工作站中并沒有對(duì)稱因子參數(shù),是以不對(duì)稱度評(píng)價(jià)的。這三種參數(shù)的關(guān)系是什么,有什么區(qū)別,今天小編就和大家聊一下。
理想條件下,色譜峰應(yīng)該具有高斯型的特征:
式中,χ等于(t-tR)/σ,t是時(shí)間,σ=W/4,y是峰高。色譜圖中的真實(shí)峰通常會(huì)稍稍偏離對(duì)稱的高斯峰形,通常會(huì)或多或少帶一點(diǎn)拖尾。如下圖所示:
拖尾因子:Tailing factor常用Tf表示,以峰高5%處計(jì)算。
不對(duì)稱因子:Asymmetry factor常用As表示,以峰高10%處計(jì)算。
對(duì)稱因子:Symmetry factor常用S表示,與不對(duì)稱因子As互為倒數(shù)關(guān)系。
As和Tf值的關(guān)系大概可以表達(dá)為:
As≈1+1.5(Tf-1)
所以一般來說As的值在一定程度上大于Tf的值。
峰形隨著不對(duì)稱因子(As)和拖尾因子(Tf)而變化。當(dāng)As或者Tf=1.0時(shí),對(duì)應(yīng)的是一個(gè)wan美的對(duì)稱色譜峰,在這種情況下,兩個(gè)色譜峰可以很好地彼此分開。然而,隨著峰拖尾的程度加重,它們之間的分離也變得糟糕。多數(shù)情況下峰拖尾的程度并不是很嚴(yán)重(Tf<1.2),并且一般不會(huì)被注意到。這種程度的拖尾(Tf<1.2)對(duì)分離造成的影響可以忽略不計(jì),除非是在一個(gè)很大的色譜峰后跟隨了一個(gè)很小的色譜峰的情況下。
拖尾因子、對(duì)稱因子和不對(duì)稱因子規(guī)定范圍探討
中國(guó)藥典(CP)要求拖尾因子的范圍是在0.95-1.05,是有一個(gè)適用前提的,即中國(guó)藥典規(guī)定峰高法定量時(shí)拖尾因子應(yīng)該在0.95-1.05之間,低于0.95為前延峰,高于1.05為拖尾峰。
歐洲藥典(EP)和英國(guó)藥典(BP)規(guī)定進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)或含量測(cè)定時(shí),除另有規(guī)定外,色譜圖中定量用對(duì)照品溶液的色譜峰對(duì)稱因子應(yīng)為0.8~1.5。
美國(guó)藥典(USP)中出現(xiàn)了對(duì)某些化合物拖尾因子要求不大于2.0。
日本藥典(JP)中沒有具體規(guī)定拖尾因子的范圍。
從各國(guó)藥典對(duì)拖尾因子范圍的約束來看,拖尾因子并沒有一個(gè)數(shù)值范圍的確定標(biāo)準(zhǔn),在實(shí)際的色譜實(shí)驗(yàn)中需要具體問題具體分析。