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離子對(duì)試劑知多少?

更新時(shí)間:2023-04-25 點(diǎn)擊次數(shù):974

哈嘍,相信有實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)的小伙伴,對(duì)于“離子對(duì)試劑"這個(gè)名詞并不陌生,因?yàn)樵谖覀內(nèi)粘z測(cè)中會(huì)經(jīng)常出現(xiàn)它們的身影,它們也實(shí)實(shí)在在幫助我們?cè)谌粘z測(cè)中,解決了很多棘手的問(wèn)題。下面小編就簡(jiǎn)單帶大家認(rèn)識(shí)下這位日常檢測(cè)幫助良多的“大功臣"。


01



原理

使用液相色譜法分析電離能力比較強(qiáng)的樣品時(shí),樣品在反相色譜柱上的保留時(shí)間很短或者根本不保留,這時(shí)要加入相應(yīng)的離子對(duì)試劑,將分析物上的離子進(jìn)行結(jié)合,形成在柱子上有保留的分子。

02



離子對(duì)試劑種類

離子對(duì)試劑的種類濃度對(duì)分離效果都有較大的影響。離子對(duì)試劑種類的選擇依賴于被分離樣品的性質(zhì)。

 被分離溶質(zhì)是強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,離子對(duì)試劑可以是強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,弱堿或弱酸。

 被分離的溶質(zhì)是弱酸或弱堿,則選用的離子對(duì)試劑必須是強(qiáng)堿或強(qiáng)酸。

 對(duì)于溶質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì)相差較大的混合樣品,離子對(duì)試劑種類的選擇并沒(méi)有特殊要求。

 離子對(duì)試劑疏水性的差別可以通過(guò)調(diào)節(jié)離子對(duì)試劑濃度和有機(jī)溶劑濃度獲得滿意的分離效果。

1. 用于酸性化合物:四丁基氫氧化銨(10%水溶液) 、四丁基溴化銨、十二烷基三甲基氯化銨。

2. 用于堿性化合物:戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉 、庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、癸烷磺酸鈉。

3. 其他離子對(duì)試劑:高氯酸鈉、三氟yi酸、七氟丁酸等。

常用離子對(duì)試劑 CAS號(hào):

1-戊烷磺酸鈉 CAS:22767-49-3

1-己烷磺酸鈉 CAS:2832-45-3

1-庚烷磺酸鈉 CAS:22767-50-6

1-辛烷磺酸鈉 CAS:5324-84-5

1-癸烷磺酸鈉 CAS:13419-61-9

03



離子對(duì)試劑選用步驟

1.選擇一根適合的色譜柱,常為C18柱。

2.準(zhǔn)備流動(dòng)相時(shí)僅使用HPLC級(jí)別的水和色譜級(jí)試劑。

3.選擇能給出最佳分離度的流動(dòng)相成分和濃度。

4.如果樣品中有非離子化物質(zhì),在嘗試離子化分離之前首先優(yōu)化分離情況。

5.選擇合適的離子對(duì)系列試劑以提供相應(yīng)的離子配對(duì):對(duì)于酸性分析物使用酸性離子對(duì)試劑;對(duì)于堿性分析物使用堿性離子對(duì)試劑。

6.通過(guò)比較選擇所得分離度zui 好的離子對(duì)試劑。

7.一旦離子對(duì)試劑已經(jīng)確定,調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值將分離度zui大化;因?yàn)槲⑿〉膒H值改變對(duì)保留性質(zhì)和選擇性都有較大的影響,所以仔細(xì)的小幅度調(diào)節(jié)pH值。

8.理想狀況下,流動(dòng)相中的離子對(duì)試劑濃度應(yīng)為0.005M,但是稍微增加離子對(duì)試劑可能會(huì)稍微增加保留性質(zhì)并因此優(yōu)化分離情況。




優(yōu)點(diǎn)

1.緩沖液制備簡(jiǎn)單。

2.使用反相色譜柱,碳鏈長(zhǎng)度選擇眾多,可用于增加保留時(shí)間、改善分離性質(zhì)。

3.即使使用較大離子,也能得到清晰的峰形且保持結(jié)果高度重現(xiàn)性。

4.分離時(shí)間縮短(與離子交換相比)。

5.適用于復(fù)雜混合物的分離(不同于離子抑制法)。

6.能夠同時(shí)分離離子化和非離子化的分析物。

7.有效改善峰形。




缺點(diǎn)

1.對(duì)色譜柱傷害較大。離子對(duì)試劑會(huì)對(duì)色譜柱造成不可逆的傷害,離子對(duì)試劑和固定相結(jié)合產(chǎn)生不可逆吸附,進(jìn)而影響固定相活性位點(diǎn)。比如十八烷基硅膠鍵合色譜柱,這種反應(yīng)對(duì)色譜柱影響很大,而且離子對(duì)試劑很難從色譜柱上沖洗干凈,會(huì)大大縮短色譜柱的使用壽命。

2.實(shí)驗(yàn)條件不穩(wěn)定。離子對(duì)試劑的濃度與其樣品的保留時(shí)間有直接的影響,而且離子對(duì)試劑對(duì)pH值比較敏感,配制流動(dòng)相時(shí)要求精確度較高。否則直接影響實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和重現(xiàn)性。

3.用離子對(duì)試劑的實(shí)驗(yàn)色譜柱平衡時(shí)間較長(zhǎng),一般都建議小流速過(guò)夜平衡。

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